胚胎工程学习中的几个疑难点解读

1．精子和卵子发生的时间不同

精子的发生是在睾丸内完成的，具体是在曲细精管内。是从雄性动物初情期（相当于人的青春期）开始的，减数第一次分裂和减数第二次分裂是连续的。卵子的发生是在卵巢内完成的。哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备是在胎儿出生前完成的，减数第一次分裂和减数第二次分裂是不连续的。

2．排卵排出的是卵母细胞

卵子发生的过程中，减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，也就是说，有些动物是在排卵前完成减数第一次分裂，有些动物是在排卵后完成减数第一次分裂，所以动物排出的卵子成熟程度不同，有的可能是初级卵母细胞，如马、犬等，有的可能是次级卵母细胞，如猪、羊和牛等。

由于排出的卵子可能是初级卵母细胞或次级卵母细胞，所以减数第一次分裂有可能是在卵巢内完成的，也可能是在输卵管内完成的。

初级卵母细胞减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程中完成的，所以女性排出的卵子都是未成熟的。如果得不到受精，那么卵母细胞将退化。

3．精子在雌性生殖道内是如何获能的？

精液由精子和精清（精浆）两部分组成。精清中含有一种能抑制精子获能的物质，因此，在一般情况下，精液中的精子无法获能。只有当交配后精液进入雌性动物的生殖道时，由生殖道分泌产生一种物质解除对精子获能的抑制，才能引起精子获能。精子在雌性动物生殖道内获能的部位因种类而异，但主要是子宫和输卵管。

4．为什么卵裂期胚胎总体积不增加或略有缩小

在卵裂期胚胎细胞进行有丝分裂的细胞周期中，间期只进行了DNA的复制，很少有蛋白质等物质的合成，所以连续的细胞分裂只是增加了胚胎细胞的数目，但每个细胞越来越小，胚胎总的体积不增加或略有缩小。

5．体外受精，采集的卵母细胞都需要在体外进行培养成熟吗？

卵母细胞的采集一般有三种方法：

第一，对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊等卵母细胞采集时，可先用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后在适当的时间从输卵管冲取卵子，并使其直接与获能的精子在体外受精。

第二，从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢，再从卵巢中采集卵母细胞。

第三，直接从活体动物的卵巢中采集卵母细胞，叫活体采卵。需借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜，直接从活的动物卵巢中吸取卵母细胞。

后两种方法适用于大家畜和大动物，卵母细胞是从卵巢中采集的，需在体外培养成熟后才能与获能的精子受精。第一种方法是从输卵管内取的卵母细胞，此时的卵母细胞已经是成熟的可以直接与获能的精子受精的，所以不需要再进行成熟培养。但超数排卵的关键是掌握卵子进入输卵管和卵子在输卵管中维持受精能力的时间，一般要求在卵子具有旺盛受精能力之前冲取。

6．卵母细胞成熟培养之前为什么要进行卵母细胞检查？如何选择用于体外培养的卵母细胞？

在选择卵母细胞时，无论用哪种方法采集到的卵母细胞，外围一般都应该有数层卵丘细胞所包围，形成一个叫卵丘复合体的结构（COC）。这种结构对于卵母细胞在体外条件下的成熟是十分重要的。在对家畜体外受精的操作中，一般把未成熟的卵母细胞分成A、B、C、D四级。对A级卵母细胞要求是有3层以上的卵丘细胞包围，卵母细胞的细胞质均匀；B级是少于3层卵丘细胞，但卵母细胞质要均匀；C级为没有卵丘细胞包围的卵母细胞，又称裸卵，培养效果很差；D级是退化或死亡的卵母细胞，应淘汰。A、B两类卵母细胞培养效果较好。

7．体外受精，精子获能处理前为什么要对精子进行离心处理？

精液由精子和精清（精浆）两部分组成。精清中含有一种能抑制精子获能的物质，因此，在一般情况下，精液中的精子无法获能。精子获能处理前对精子进行离心处理，目的是除去精清以利于精子获能。

8．精子或卵子是依靠什么来识别自己的另一半呢？

同种动物精子、卵细胞表面有特异性相互识别的蛋白，这是同种动物精卵才能结合的原因之一。